Ang iba't ibang bacterial infection ay nangangailangan ng malinaw na pagkakakilanlan ng pathogen at ang kahulugan ng mga species nito. Upang matukoy ang uri ng microorganism, ang mga microbiologist ay tinutulungan ng mga katangian ng tinctorial nito - ang pagkamaramdamin ng mikrobyo sa paglamlam ng iba't ibang mga tina. Ang pamamaraang ito ay nagbibigay-daan sa iyo upang galugarin ang morpolohiya ng pathogen. Ang mga katangian ng tinctorial ng bakterya ay napakahalaga para sa praktikal at teoretikal na pananaliksik sa larangan ng microbiology.
Microbial research
Sa bacteriology, maraming paraan para sa paglamlam ng microorganism. Ang lahat ng mga ito ay batay sa mga katangian ng tinctorial ng bakterya. Ang paglamlam ay nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang kanilang hugis, istraktura, sukat, kamag-anak na posisyon. Nagbibigay-daan ito sa paglutas ng mga problema sa pag-systematize ng mga uri ng microorganism ng pangkalahatang biology at comparative microbiology.
Bakit pininturahan ang mga ito
Ang bakterya ay halosmga transparent na organismo, at nang walang paggamit ng paglamlam, ang mga ito ay hindi gaanong nakikita para sa maginoo na mikroskopya. Maaari kang gumamit ng mga espesyal na uri ng microscopy (phase contrast, dark field) para pag-aralan ang mga bagay, ngunit ang pinakamadaling paraan ay ang mantsa, pagkatapos ay makikita ang bacteria sa isang conventional light microscope.
Sample na paghahanda
Anuman ang pamamaraan ng paglamlam na ginamit, may mga pare-parehong panuntunan para sa paghahanda ng bagay na pinag-aaralan. Ang mga sumusunod na yugto ay sapilitan:
- Ang mga sterile na instrumento ay gumagawa ng pahid sa isang glass slide.
- Ang sample ay tinutuyo. Ginagawa ito sa temperatura ng silid o gamit ang mga drying cabinet.
- Sinusundan ng yugto ng pag-aayos - ang mga mikroorganismo ay nakakabit sa salamin na may mga espesyal na compound.
- Tamang paglamlam - ang sample ay natatakpan ng pangulay para sa isang nakapirming tagal ng panahon, pagkatapos nito ay hugasan.
- Huling pagpapatuyo - ang sample ay tuyo muli.
Ang pinakakaraniwang tina
Ang pinakakaraniwang ginagamit na mga tina ay batay sa aniline na may iba't ibang halaga ng acid (pH). Karamihan sa mga tina ay mga pulbos na natunaw sa alkohol.
Ang mga tina kung saan ang mga cation ay ang mga ahente ng pangkulay ay tinatawag na basic (pH na higit sa 7). Magagamit ang mga ito para mantsang ang mga microorganism sa pula (magenta, safranin), violet (methyl violet, thionine), blue (methylene blue), berde (malachite green), brown (chrysoidin) at black (indulin) na mga kulay.
Mga tina, kung saan ang mga pangkulay ay anion, ay tinatawag na acidic (pH na mas mababa sa 7). Babahiran nila ang sample na pula (eosin), dilaw (picrin), o itim (nigrosin).
May pangkat ng mga neutral na tina (halimbawa, rhodamine B), kung saan ang parehong mga cation at anion ay gumaganap bilang mga ahente ng pangkulay.
Kultura patay o buhay
Ang mga paraan ng paglamlam ay nahahati sa dalawang grupo ayon sa anyo ng buhay ng test specimen.
- Vital (lifetime) staining. Ang pamamaraang ito ng pag-aaral ng mga katangian ng mga mikroorganismo ay ginagamit sa pag-aaral ng mga nabubuhay na tisyu, na ginagawang posible na obserbahan ang mahahalagang proseso ng mga mikrobyo. Para sa paglamlam na ito, ginagamit ang mga tina na may mababang toxicity at mataas na penetrating power.
- Post-vital staining. Ito ay ang paglamlam ng patay o napatay na mga mikroorganismo. Salamat sa mga katangian ng tinctorial ng bakterya, tinutukoy ng mga microbiologist ang kanilang istraktura. Ang paglamlam na ito ang pinakamadalas na ginagamit.
Gram-positive at Gram-negative
Ito ang mga katangian ng bacteria na makikita sa mga tagubilin para sa iba't ibang gamot. Ang pamamaraang ito ng pag-aaral ng mga katangian ng tinctorial ng bakterya ay batay sa paggamit ng gentian violet dye at pag-aayos ng yodo. Ito ang pamamaraan ni Hans Christian Gram, isang Danish na manggagamot na nagmungkahi nito noong 1884. Bilang resulta ng paglamlam na ito, nahahati ang bacteria sa dalawang grupo:
- Gram (+) - maging asul(staphylococci at streptococci).
- Gram (-) - stain pink to red (enterobacteria, salmonella, E. coli).
Ang iba't ibang resulta ng paglamlam ay dahil sa iba't ibang katangian ng tinctorial ng bacterial wall. Ang pamamaraang Gram stain pa rin ang pangunahing paraan sa pagsusuri ng ilang mga nakakahawang sakit.
Iba pang pamamaraan ng paglamlam
Ating tukuyin ang ilan pang paraan na malawakang ginagamit sa bacteriology.
- Ziehl-Nelson method - tinutukoy ang acid resistance ng bacteria. Tinutukoy nito ang mga sanhi ng tuberculosis at mycobacteriosis.
- Romanovsky-Giemsa technique - dinudungisan ang acidophilic (acetic acid at lactic acid) bacteria na pula, at basophilic (spirochetes at protozoa) na asul.
- Ang pamamaraan ni Morozov - dinudungisan ng kayumanggi ang bacteria at ginagawang nakikita ang kanilang flagella.
Makikita ang mga spores
Tsiel's fuchcin staining ay nagbibigay-daan sa iyong makakita ng bacterial spores. Ang pagkakaroon ng kulay rosas na kulay pagkatapos ng paglamlam, malinaw na nakikita ang mga ito laban sa background ng asul na bakterya. Ang pamamaraang ito ay isa ring kasangkapan ng bacteriology at may malaking praktikal na kahalagahan.
