Ang terminong "microscopy" ay may mga ugat na Greek. Sa pagsasalin, nangangahulugan ito ng pag-aaral ng mga bagay gamit ang mga instrumentong may mataas na katumpakan. Kamakailan, lalong naging popular ang fluorescence at electron microscopy.
Resolution
Sa ilalim nito, bilang panuntunan, nauunawaan nila ang pinakamababang distansya kung saan makikita ang mga bagay na malinaw na nakikilala. Ang antas ng pagtagos sa mikroskopikong mundo, ang kakayahang isaalang-alang ang laki ng elemento sa ilalim ng pag-aaral ay depende sa resolusyon ng kagamitan. Sa mataas na pag-magnify, ang mga hangganan ng mga bagay ay maaaring pagsamahin. Alinsunod dito, may ilang partikular na limitasyon kung saan ang pagtatantya ng mga elemento ay walang kahulugan.
Luminescence microscopy method: mekanismo
Kapag ang enerhiya na hinihigop ng isang substance ay na-convert sa nakikitang radiation, nangyayari ang isang glow. Ito ay tinatawag na luminescence. Ang hindi pangkaraniwang bagay na ito ay dahil sa ang katunayan na ang ilang mga sangkap, sa ilalim ng impluwensya ng liwanag, ay nagsisimulang maglabas ng mga sinag na may ibang (karaniwang malaki) na haba ng daluyong. Bilang karagdagan, ang ilang mga bagay na, sa ilalim ng normal na pag-iilaw, ay may tiyakkulay, sa ilalim ng impluwensya ng ultraviolet ay nagbabago ang kanilang kulay.
Mga Tukoy
Ang isang bagay na hindi nakikita sa ilalim ng ultraviolet light ay maaaring maglabas ng maliwanag na ningning kung ito ay ginagamot ng isang espesyal na substance. Sa loob nito, ang mga elemento ay kumikinang sa iba't ibang kulay sa dilim. Ang lakas ng radiation ay naiiba, ngunit, bilang isang patakaran, ito ay maliit. Sa bagay na ito, ang fluorescence microscopy ay epektibo sa isang madilim na silid. Kapag gumagamit ng ganitong uri ng pag-aaral, ang bagay ay tinitingnan sa liwanag na ito mismo ay naglalabas. Ang kemikal na komposisyon ng mga tisyu, ang mga selula ay makakaapekto sa kalidad ng pag-aaral. Ang fluorescence microscopy ay itinuturing na isang histochemical study sa isang tiyak na lawak.
Pag-uuri
Fluorescence microscopy ay maaaring pangunahin o pangalawa. Sa huling kaso, ang bagay ay pinoproseso ng mga espesyal na compound na nagbibigay ng glow. Ang pangunahing fluorescent microscopy ay batay sa sariling kakayahan ng elemento na maglabas ng liwanag.
Kagamitan
Fluorescence microscopy ay ginagawa gamit ang iba't ibang device. Ang kanilang pangunahing elemento ay ang illuminator. Nilagyan ito ng UV lamp. Bilang karagdagan, ang mga aparato ay gumagamit ng isang hanay ng mga filter. Sa ilang device, medyo marami ang iba't ibang configuration. Depende sa kung aling kulay ang ginagamit upang pukawin ang luminescence - ultraviolet o asul, isang naaangkop na filter ang inilalagay sa pagitan ng pinagmumulan ng liwanag at ng bagay na pinag-aaralan. Dahil ang glow ng isang microscopic na elemento ay masigasig na mas mahina kaysa sa kapana-panabik na liwanag, ito ay makukuha lamang sa ilalim ng isang kundisyon. Ang labis na sinag mula sa pinagmulan ay dapat putulin ng isang dilaw-berdeng filter. Matatagpuan ito sa eyepiece ng device. Ang pinakamaliwanag na epekto ng luminescence ay kapag ganap na pinutol ng filter ang mga sinag na nagmumula sa pinagmumulan ng liwanag.
Ano ang binubuo ng visible light installation? Naglalaman ito ng maliwanag na pinagmumulan ng liwanag at isang biological microscope. Ang isang asul na violet na filter ay inilalagay sa pagitan ng salamin ng aparato at ng lampara. Maaari itong maging FS-1, UFS-3 at iba pa. Ang dilaw na filter ay inilalagay sa eyepiece ng mikroskopyo. Sa kanilang tulong, bumagsak ang asul-lila na ilaw sa bagay. Pinasisigla nito ang luminescence. Ngunit ang liwanag na ito ay maaaring makagambala sa pagkakita ng glow. Samakatuwid, sa daan patungo sa mata, ito ay pinutol ng isang dilaw na filter. Ang pag-iilaw ay itinakda ayon sa pamamaraan ng Koehler, na may isang pagbubukod. Ang condenser diaphragm ay dapat na ganap na buksan. Kapag nagsusuri, mahalagang gumamit ng non-fluorescent immersion oil. Upang mabawasan ang sarili nitong glow, idinagdag dito ang nitrobenzene (2-10 patak / 1 g).
Luminescence microscopy: mga application sa microbiology
Ang mga benepisyo ng ganitong uri ng pag-aaral ay:
- Kakayahang imaging ng kulay.
- Mataas na contrast na self-emitting na mga elemento sa isang itim na background.
- Detection at localization ng ilang partikular na uri ng mga virus at microbes.
- Ang kakayahang mag-aral ng transparent at opaquemga buhay na organismo.
- Pag-aaral ng mga proseso ng buhay sa kanilang dinamika.
Dapat ding sabihin na ang luminescent microscopy ay nag-aambag sa pagbuo ng pinakamagagandang pamamaraan ng histo- at cytochemistry, express diagnostics.
