Ang pananaliksik sa bacteria ay nangangailangan ng masusing trabaho gamit ang maraming kagamitan at instrumento. Upang ang mga microorganism ay dumami nang mabilis hangga't maaari sa mga kondisyon ng laboratoryo at upang mapanatili ang normal na mahahalagang aktibidad, ginagamit ang espesyal na nutrient media. Ang kanilang komposisyon at biophysical na kondisyon ay angkop para sa aktibong paglaki ng isang bacterial culture.
Nutrient media. Microbiology at iba pang mga application
Ang mga bacterial colonies ay lumaki sa laboratoryo sa mga Petri dish na puno ng mala-jelly o semi-liquid na nilalaman. Ang mga ito ay nutrient media, ang komposisyon at mga katangian nito ay mas malapit hangga't maaari sa mga natural para sa mataas na kalidad na paglago ng pananim.
Ang ganitong mga kapaligiran ay ginagamit sa microbiological research at sa mga medikal na diagnostic laboratories. Ang huli ay madalas na gumagana sa mga pahid ng pathogenic o oportunistikong bakterya, ang sistematikong posisyon nito ay direktang tinutukoy sa institusyon.
Natural at syntheticMiyerkules
Ang pangunahing tuntunin ng pagtatrabaho sa bacteria ay ang tamang pagpili ng nutrient medium. Dapat itong matugunan ang maraming pamantayan, kabilang ang nilalaman ng micro at macro elements, enzymes, isang pare-parehong halaga ng acidity, osmotic pressure, at maging ang porsyento ng oxygen sa hangin.
Ang masustansyang media ay inuri sa dalawang malalaking grupo:
- Mga natural na kapaligiran. Ang ganitong mga mixtures ay inihanda mula sa mga natural na sangkap. Maaaring ito ay tubig ng ilog, mga bahagi ng halaman, pataba, gulay, mga tisyu ng halaman at hayop, lebadura, atbp. Ang ganitong mga kapaligiran ay nailalarawan sa pamamagitan ng mataas na nilalaman ng mga natural na kemikal, ang iba't ibang uri nito ay nagtataguyod ng paglago ng kultura ng bakterya. Sa kabila ng mga halatang pakinabang na ito, hindi pinapayagan ng mga natural na kapaligiran para sa espesyal na pananaliksik na may mga partikular na strain ng bacterial.
- Sintetikong media. Naiiba ang mga ito dahil ang kanilang kemikal na komposisyon ay kilala sa eksaktong mga ratio ng lahat ng mga nasasakupan. Ang nasabing media ay inihanda para sa isang tiyak na kultura ng bakterya, ang metabolismo na kung saan ay kilala nang maaga sa mananaliksik. Sa totoo lang, sa kadahilanang ito, posible na maghanda ng gayong sintetikong kapaligiran para sa pagpapaunlad ng mga mikroorganismo. Ginagamit ang mga ito upang pag-aralan ang mahahalagang aktibidad ng bakterya. Halimbawa, maaari mong malaman kung anong mga sangkap ang inilalabas nila sa kapaligiran at kung magkano. Lalago rin ang mga mikroorganismo sa natural na media, ngunit imposibleng masubaybayan ang anumang dami ng pagbabago sa komposisyon dahil sa kamangmangan sa mga paunang proporsyon ng mga sangkap.
Differential-diagnostic na kapaligiran
Sa pagtatrabaho sa bacteria, hindi lamang ordinaryong nutrient media ang maaaring gamitin. Ang microbiology ay isang malawak na agham, at samakatuwid, kapag nagsasagawa ng isang pag-aaral, kung minsan ay kinakailangan na gumawa ng isang seleksyon ng mga microorganism para sa ilang kadahilanan. Ang paggamit ng differential diagnostic media sa laboratoryo ay ginagawang posible na piliin ang ninanais na bacterial colonies sa isang Petri dish ayon sa biochemical sign ng kanilang mahahalagang aktibidad.
Ang komposisyon ng naturang mga kapaligiran ay palaging kasama ang mga sumusunod na bahagi:
1. Mga nutrisyon para sa paglaki ng cell.
2. Nasuri na substrate (substance).
3. Isang indicator na magbibigay ng kakaibang kulay kapag may naganap na reaksyon.
Ang isang halimbawa ay ang differential diagnostic nutrient medium na "Endo". Ito ay ginagamit upang pumili ng mga kolonya ng bakterya na maaaring masira ang lactose. Sa una, ang daluyan na ito ay may kulay rosas na kulay. Kung ang isang kolonya ng mga mikroorganismo ay hindi masira ang lactose, ito ay tumatagal sa karaniwang puting kulay. Kung masisira ng bacteria ang substrate na ito, magiging isang katangian ang matingkad na pulang kulay.
Elective Wednesdays
Ang mga diagnostic lab ay kadalasang gumagana sa mga pamunas na naglalaman ng maraming iba't ibang uri ng bacteria. Malinaw, para sa de-kalidad na trabaho, kinakailangan na kahit papaano ay pumili ng mga kolonya na kailangan natin mula sa dose-dosenang mga tagalabas. Dito makakatulong ang bacterial growth medium, na perpektong binuo upang suportahan lamang ang isang uri ng microorganism.
Halimbawa,ang ganitong elective na kapaligiran ay angkop lamang para sa pagpaparami ng Escherichia coli. Pagkatapos, mula sa paghahasik ng maraming bakterya sa isang Petri dish, makikita lamang natin ang mga kolonya ng parehong Escherichia coli at wala na. Bago simulan ang trabaho, kinakailangang alamin nang mabuti ang metabolismo ng pinag-aralan na bacterium upang matagumpay na mapili ito mula sa pinaghalong iba pang mga species.
Solid, semi-solid at liquid culture media
Ang bakterya ay maaaring lumaki hindi lamang sa mga solidong substrate. Ang nutrient media ay naiiba sa bawat isa sa kanilang estado ng pagsasama-sama, na nakasalalay sa komposisyon sa panahon ng paggawa. Sa una, lahat sila ay may liquid consistency, at kapag ang gelatin o agar ay idinagdag sa isang partikular na porsyento, ang timpla ay tumitigas.
Liquid culture media ay karaniwang makikita sa mga test tube. Kung kinakailangan na lumaki ang bakterya sa ilalim ng gayong mga kondisyon, magdagdag ng solusyon na may sample ng kultura at maghintay ng 2-3 araw. Maaaring mag-iba-iba ang resulta: may namuong mga namuo, lumilitaw ang isang pelikula, lumutang ang maliliit na natuklap, o nabubuo ang maulap na solusyon.
Dense culture medium ay kadalasang ginagamit sa microbiological research para pag-aralan ang mga katangian ng bacterial colonies. Palaging transparent o translucent ang naturang media upang matukoy nang tama ang kulay at hugis ng kultura ng mga microorganism.
Paghahanda ng media
Ang mga substrate tulad ng meat-peptone mixtures batay sa sabaw, gelatin o agar ay napakadaling ihanda. Kung kailangan mong gumawa ng solid o semi-liquid substrate, sa isang likidomagdagdag ng 2-3% o 0, 2-0, 3% gelatin o agar, ayon sa pagkakabanggit. Malaki ang papel nila sa pagpapatigas ng pinaghalong, ngunit hindi sila pinagmumulan ng mga sustansya. Kaya, nakukuha ang nutrient media na angkop para sa paglaki ng bacterial culture.
