Mga paraan para sa pag-set up ng reaksyon ng pag-ulan

Talaan ng mga Nilalaman:

Mga paraan para sa pag-set up ng reaksyon ng pag-ulan
Mga paraan para sa pag-set up ng reaksyon ng pag-ulan
Anonim

Ang artikulong ito ay nakatuon sa hindi pangkaraniwang bagay ng reaksyon ng pag-ulan. Dito ay isasaalang-alang natin ang mga tampok ng pagbabalangkas ng hindi pangkaraniwang bagay na ito, ang kababalaghan ng diffusion, pangkalahatang katangian, papel sa buhay ng tao at marami pang iba.

Introduksyon sa phenomenon

pangkalahatang katangian ng reaksyon ng ulan
pangkalahatang katangian ng reaksyon ng ulan

Ang pag-ulan ay isang phenomenon ng isang serological na uri, kung saan ang mga natutunaw na antigen ay nakikipag-ugnayan sa mga antibodies at, bilang resulta, ang pag-ulan ay naobserbahan - isang pag-ulan.

Ang pangkalahatang katangian ng reaksyon ng pag-ulan ay isang anyo ng coordinated na impluwensya ng antigen at antibody. Ginagawang posible ng mga ganitong uri ng pakikipag-ugnayan na matukoy ang pagkakaroon ng hindi kilalang mga antigen sa sangkap ng pagsubok sa pamamagitan ng pagdaragdag ng mga kilalang antibodies at antigens. Ang proseso ng pag-ulan nang walang pagkakaroon ng mga asin ay magpapatuloy nang mas malala, at ang pinakamahusay na pinakamabuting kalagayan ay nasa hanay na 7.0-7.4 pH.

Mga sangkap ng isang reaksyon

mga bahagi ng reaksyon ng ulan
mga bahagi ng reaksyon ng ulan

May tatlong pangunahing elemento sa mga bahagi ng reaksyon ng pag-ulan:

  1. Isang antigen na may likas na molekular. Ito ay nasa fine type state, sa madaling salita, itonalulusaw. Gayundin, ang naturang antigen ay tinatawag na precipitogen, na isang lysate o tissue extract, atbp. Ang isang precipitogen ay may katangiang pagkakaiba mula sa isang agglutinogen, na nasa laki ng mga particle na binubuo nito. Ang aglutinogen ay may likas na laki ng cell, at ang mga precipitogen ay katumbas ng laki ng molekula. Ang solusyon sa antigen ay nailalarawan sa pamamagitan ng transparency.
  2. Isang antibody na matatagpuan sa serum ng dugo ng tao, gayundin sa immune diagnostic serum, na naglalaman ng mga pinag-aralan na antibodies.
  3. Ang mga electrolyte ay mga sodium chloride solution na isotonic.

Precipitogen production

Ang pag-set up ng precipitation reaction ay imposible nang walang precipitogen, na nakukuha sa pamamagitan ng paggiling ng mga materyales at pagkuha ng mga antigen ng protina mula sa kanila. Ang pagkuha ay nangyayari sa pamamagitan ng pagpapakulo o iba pang pamamaraan.

Lysates, pati na rin ang tissue at organ extracts, blood serum, iba't ibang uri ng filtrates batay sa microbial broth culture, pati na rin ang s alt extract ng microorganisms at autolysate substance, ay isang kapansin-pansing halimbawa ng precipitogens.

Pag-set up sa pag-ulan

Ngayon, isaalang-alang natin ang paraan ng pagse-set up ng precipitation reaction.

Isang ring-precipitation reaction ang ginagawa, na nagaganap sa mga espesyal na inihandang test tube. Ang serum ay ipinakilala sa lukab ng mga pinggan, ibinubuhos ito sa dingding sa tulong ng isang pipette spout. Susunod, ang naaangkop na dami ng precipitater ay maingat na inilalagay sa itaas, at pagkatapos ay ang tubo ay dinadala sa isang patayong posisyon mula sa isang pahalang. Ang pag-set up at pagsasaalang-alang sa reaksyon ng pag-ulan ay isang napaka-meticulous na operasyon. Ang resulta ay naitala pagkatapos ng paglitaw ng isang puting singsing sa hangganan sa pagitan ng antigen at antibody. Kung ang mga tumutugon na elemento ng reaksyon ay tumutugma sa isa't isa, pagkatapos ay nagbubuklod sila, ngunit ito ay nagiging kapansin-pansin pagkatapos ng mahabang panahon ng kanilang pakikipag-ugnayan.

Ang reaksyon ng pag-ulan ay isinasagawa din sa isang Petri dish o sa isang baso slide, kung saan inililipat ang agar gel, inilalapat ito sa isang maliit na layer. Matapos itong tumigas sa gel, isang maliit na bilang ng mga balon ang pinutol kung saan ilalagay ang mga antigen at antibodies. Mayroong dalawang paraan upang maisagawa ang pagkilos na ito: ang paraan ng radial immunodiffusion at double immunodiffusion.

hindi ginagamit ang precipitation reaction
hindi ginagamit ang precipitation reaction

Pangkalahatang impormasyon

Ang mekanika ng gawain ng pag-ulan ay katulad ng agglutination device. Sa ilalim ng impluwensya ng immune-type na serum, ang antigen, na pumasok na sa reaksyon, ay binabawasan ang antas ng dispersity nito. Ang isang mahalagang kondisyon ay ang transparency ng parehong serum at antigen.

Maaari mong pagbutihin ang pagpaparehistro ng reaksyon kung ipapatong mo ang mga antigen sa mga antibodies. Bilang isang resulta, ang hitsura ng mga precipitates sa anyo ng isang singsing ay maaaring obserbahan. Ang hindi pangkaraniwang bagay na ito ay tinatawag na ring precipitation at isinasagawa sa mga espesyal na tubo na may diameter na 2.5 hanggang 3.5 mm. Ang isa sa mga pinakakaraniwang halimbawa ng reaksyon ng pag-ulan ay ang diagnosis ng anthrax.

Pinagagawang posible ng pag-ulan na matukoy ang antas ng toxicity ng kultura ng diphtheria sa agar.

Sa panahon ng reaksyong isinasaalang-alangAng pag-ulan ng mga antigenic complex at antibodies ay nangyayari. Ang pag-ulan ay isang immunological phenomenon na nagbibigay-daan sa iyong matukoy ang dami ng antibodies sa serum ng dugo ng isang may sakit o nabakunahan na tao at hayop.

Titration Consequence

mga pamamaraan para sa pag-set up ng isang reaksyon ng pag-ulan
mga pamamaraan para sa pag-set up ng isang reaksyon ng pag-ulan

Mahalagang malaman na ang data na nakuha sa pamamagitan ng titration ng pamamaraan sa itaas ay hindi nasusukat. Upang lumikha at pag-aralan ang isang quantitative assessment ng nilalamang bilang ng mga antibodies, isang espesyal na diskarte sa reaksyon ang binuo ni M. Heidelberger at E. Kabat, na batay sa paghahanap at pagkakakilanlan ng equivalence zone. Ang paghahalo ng bilang ng edad ng mga antigen na may pare-parehong dami ng antiserum ay humahantong sa isang pagtaas sa paunang nabuo na namuo, at pagkatapos ay bumababa muli dahil sa pagtaas ng kakayahang matunaw ang mga antigen complex. Sa pamamagitan ng pagtukoy sa dami ng mga antibodies sa mga supernatant na nakapaloob sa bawat tubo, makikita mo na ang isang tiyak na bilang ng mga pagkaing may antibodies ay mawawalan ng likido. Dito, kung ihahambing sa iba pang mga test tube, ang pinakamalaking precipitate ay mabubuo. Dahil dito at ang pagbabawas ng antigenic na protina ay namuo mula sa kabuuang halaga ng mga protina, posibleng makuha ang eksaktong halaga ng mga antibodies na nakapaloob sa dami ng partikular na serum na pinag-aaralan. Dagdag pa, ang dami ng mga molekula ng protina ng precipitate ay tinutukoy ng dami ng nitrogen o paggamit ng mga colorimetric na pamamaraan.

Pagsusuri ng mga halaga

setting at accounting para sa precipitation reaction
setting at accounting para sa precipitation reaction

Ang pagtatantya ng mga halaga ng pag-ulan sa diagnostic methodology ay dapat isaalang-alang ang posibilidad ng pagkakaroon sa immune serum ng isang antibody na walang pag-aari ng precipitin, kung saan sumusunod na ang precipitate mismo ay maaaring hindi nabuo pagkatapos ng reaksyon sa mga antigens. Kasama sa listahan ng mga naturang molekula ang mga hindi kumpletong antibodies at ilang species mula sa pangkat ng gamma-A globulins.

Ang reaksyon ng pag-ulan sa mga kondisyon ng laboratoryo ay nahahanap ang aplikasyon nito sa iba't ibang uri ng mga pagbabago. Halimbawa, ang thermoprecipitation reaction ay ginagamit upang makita ang bacterial antigens ng botulism, anthrax, atbp., na hindi sumasailalim sa thermal denaturation. Hindi tulad ng ring precipitation, ang ganitong uri ng reaksyon ay gumagamit ng mga filtrate ng materyal na pinag-uusapan sa isang pinakuluang estado.

Ang pagsusuri ng reaksyon ng precipitation sa isang kumplikadong timpla ay hindi nagpapahintulot sa isa na makilala ang mga katangian ng mga indibidwal na elemento ng pinaghalong. Sa ganitong mga kaso, ang isang tao ay gumagamit ng paraan ng pag-ulan sa agar, at gumagamit din ng immunoelectropheresis.

Diffuse precipitation

mga reaksyon sa pag-ulan
mga reaksyon sa pag-ulan

Sa lugar na ito ng pananaliksik, mayroong konsepto ng diffuse precipitation reaction (RPD). Ito ay batay sa kakayahang magkalat sa gel ng mga antibodies at natutunaw na antigens. Ang diffusion ay ang kakayahan ng isang molekula ng isang partikular na substance na tumagos sa mga molekula ng iba, na sanhi ng thermal movement.

Ang gel ay isang dispersed type system kung saan ang liquid phase ay pantay na ipinamamahagi sa solid phase. Kadalasan, ginagamit ang agar gel para sa ganoong reaksyon.

Pagkatapos ibigay ang mga parameter, samga kondisyon kung saan ang mga molekula ay maaaring magkalat na may paggalang sa isa't isa, ang kanilang pagpupulong ay sasamahan ng pagbuo ng isang antigen + antibody complex. Ang ganitong neoplasma ay maaaring kumalat, na nasa gel mismo, at ito ay namuo, na kumukuha ng anyo ng isang strip na maaaring makita ng mata. Kung ang antigen at antibody ay homologous, walang band na bubuo.

Paglikha ng mga kondisyon kung saan magaganap ang diffusion habang nasa agar layer ay nagsasangkot ng pagbuhos ng mga bahagi, ngunit ang kabuuang bilang ng mga balon at ang kanilang relatibong posisyon ay tinutukoy ng ang uri ng gawain na kinakailangan ay magpasya. Ang RPD ay nagbibigay sa isang tao ng kakayahang tumukoy at matukoy ang mga hindi kilalang nakahiwalay na mga virus sa pamamagitan ng pagsubok gamit ang kilalang antibody sera.

Application

nagkakalat na reaksyon ng pag-ulan
nagkakalat na reaksyon ng pag-ulan

Ang pag-ulan ay malawakang ginagamit hindi lamang sa pagsusuri ng mga sakit, ngunit nakikita rin ang aplikasyon nito sa forensic na medikal na pagsusuri. Mahirap isipin ang isang pagsusuri kung saan posibleng matukoy ang mga species ng dugo, bahagi ng isang organ o tissue na matatagpuan sa isang sandata ng krimen na hindi gumagamit ng reaksyon ng pag-ulan. Sa prosesong ito, ginagamit ang precipitating sera, na nakukuha sa pamamagitan ng pagbabakuna sa iba't ibang hayop at ibon. Mahalaga na ang antas ng serum titer ay hindi bababa sa 1:10000, at dapat din itong may sapat na pagtitiyak. Mula sa nakitang lugar ng dugo o crust nito, ang isang katas ay ginawa para sa pisikal. solusyon, na mas malalantad sanamumuong serum. Ayon sa reaksyong ito, posibleng maitatag ang mga uri ng tissue at organ proteins ng parehong tao at hayop. Ang pagkuha ng maulap na extract ay nagpipilit sa isa na gumamit ng pag-ulan sa agar.

Mga Konklusyon

Sinusuri ang nabasang impormasyon, maaari nating tapusin na ang mga reaksyon ng pag-ulan ay lubhang mahalaga para sa isang tao, dahil pinapayagan nila ang pag-diagnose ng iba't ibang antigens gamit ang mga antibodies, ang hindi pangkaraniwang bagay na ito ay malawakang ginagamit sa forensic na medikal na pagsusuri at nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang uri ng dugo, tissue o organ ayon sa kaugnayan sa isang partikular na paksa. Mayroong ilang mga uri at paraan ng pag-ulan, na ginagamit alinsunod sa mga umuusbong na pangangailangan ng problemang nilulutas.

Inirerekumendang: