Ang Selenite broth ay isang enrichment medium na may mga piling katangian, na idinisenyo upang ihiwalay ang mga pathogenic bacteria ng genus Salmonella (lat. Salmonella). Ito ay napaka-epektibo kung kinakailangan upang makita ang partikular na pathogen na ito sa iba pang mga kinatawan ng bituka microflora. Ginagamit ang medium para sa parehong clinical diagnostics at sanitary purposes sa food testing.
Mga pangkalahatang katangian
Ang Selenite broth ay inihanda batay sa isang pulbos, na isang homogenized na halo ng iba't ibang bahagi ng komposisyon. Ang kulay ng tuyong materyal ay maaaring mapusyaw na dilaw o cream, depende sa uri ng daluyan. May free flowing properties ang powder.
Ready selenite broth ay isang likidong transparent na daluyan ng mapusyaw na dilaw na kulay. Ang masa na ito ay ibinubuhos sa mga lalagyan kung saan isinasagawa ang paghahasik para sa karagdagang pagpapapisa ng itlog.
May tatlong pangunahing uri ng selenite broth:
- pure medium - angkop para sa paghihiwalay ng Salmonella mula sa parehong klinikal at sanitary na materyal;
- may pagdaragdag ng mannitol (two-component broth) - idinisenyo upang gumana sa klinikal na materyal lamang;
- cysteine-selenite medium - maaaring gamitin para ihiwalay ang Salmonella mula sa pathological na biomaterial ng pasyente (dumi, ihi, atbp.).
Ang mga uri na ito ay bahagyang naiiba sa komposisyon at mga tampok ng pagkilos.
Ang pangunahing gawain ng sabaw ng selenite ay upang itaguyod ang akumulasyon ng salmonella, na pumipigil sa paglaki ng kasamang microflora. Ginagawa nitong posible hindi lamang upang makita ang pathogen sa materyal, kundi pati na rin kasunod na ilipat ito sa agar. Ang medium ay binuo ni Leifler, na unang nakatuklas ng selective effect ng selenite laban sa Salmonella.
Komposisyon
Selenite broth ay naglalaman ng:
- casein hydrolyzate;
- lactose;
- sodium phosphate;
- sodium hydroselenite.
Selenite-cysteine medium, bilang karagdagan sa mga sangkap na ito, ay naglalaman ng L-cysteine at sodium hydrogen phosphate. Ang komposisyon ng sabaw ng mannitol ay naiiba sa halip na casein hydrolyzate, kabilang dito ang peptic digest ng tissue ng hayop. Walang lactose sa gayong kapaligiran, ngunit mayroong mannitol. Ang huli ay gumaganap bilang isang fermentable substrate at nagbibigay ng buffering properties ng sabaw.
Lahat ng bahagi ng powder, maliban sa sodium hydroselenite, ay may kondisyong tinatawag na part A, at ang selective substance ay tinatawag na part B.
Ang prinsipyo ng pagpapatakbo at mga katangian ng kapaligiran
Gumagana ang Selenite broth bilang storage mediumna may piling pagkilos. Ang pumipili na epekto ay ibinibigay dahil sa toxicity ng selenite, na pumipigil sa paglaki ng karamihan sa mga microorganism. Kasabay nito, ang bakterya ng genus Salmonella ay nakapagpapanumbalik ng tambalang ito, sa gayon ay inaalis ang nakakalason na epekto sa kanilang sariling mga selula. Gayunpaman, bilang isang resulta ng reaksyon, nabuo ang isang alkali, na binabawasan ang nakakapinsalang epekto ng selenite sa paglago ng nauugnay na microflora, at samakatuwid ay kinakailangan upang patatagin ang pH. Ang function na ito ay ginagampanan ng bacteria na nagbuburo ng lactose sa pagbuo ng acid. Ang buffering ng medium ay ibinibigay ng phosphate.
Sa dalawang bahagi na sabaw, ang pH ay pinapatatag ng mannitol. Ang medium ng cysteine ay nagpapabuti sa pumipili na epekto laban sa Salmonella. Ang ganitong sabaw ay epektibo para makontrol ang nakakahawang background sa mga pasyenteng may hindi talamak na yugto ng sakit o convalescents.
Ang pagpapakita ng mga katangian ng paglago ng mga reference strain sa medium ay maaaring maobserbahan pagkatapos ng 12-24 na oras mula sa simula ng incubation. Sa kasong ito, ang Salmonella ay bumubuo ng mga walang kulay na kolonya.
Mga Feature sa Pagluluto
Ang paghahanda ng midyum ay isinasagawa sa dalawang yugto. Una, ang isang solusyon ay ginawa gamit ang isang pumipili na bahagi sa rate ng 4 na gramo ng sodium selenite bawat litro ng distilled water. Pagkatapos ay magdagdag ng 19 gramo ng pangunahing pulbos (bahagi A). Ang solusyon ay lubusan na hinahalo at pinainit hanggang ang mga particle ay ganap na natunaw, pagkatapos ay ibuhos ito sa mga sterile test tube.
Kapag nagluluto, mahalagang sundintemperatura ng rehimen, dahil ang daluyan ay hindi matatag sa sobrang pag-init. Ang sterilization ng sabaw ay maaaring isagawa lamang sa isang paliguan ng tubig o gumamit ng isang jet ng singaw. Ang autoclaving ng medium ay mahigpit na ipinagbabawal.